Высокоэффективная жидкостная хроматография — масс-спектрометрия — это аналитический метод, который объединяет две техники: высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) и масс-спектрометрию (МС). Он позволяет разделить, идентифицировать и количественно измерить различные соединения в сложных смесях.
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) — это метод разделения химических соединений на основе их взаимодействия с фазами стационарной и подвижной. В ЭЖХ анализируемая смесь разделяется на компоненты в жидкой фазе, проходя через колонку с наполнителем, обычно состоящим из частиц с определенными химическими свойствами. Компоненты взаимодействуют с колонкой по-разному и проходят через нее с разной скоростью, что приводит к их разделению.
Масс-спектрометрия (МС) — это аналитический метод, который измеряет массу ионов, образованных из анализируемых соединений. В МС соединения ионизируются, обычно с помощью электронного или лазерного возбуждения, и образовавшиеся ионы разделяются на основе их отношения массы к заряду (m/z). Полученные ионы регистрируются и создают масс-спектр, который представляет собой график интенсивности ионов в зависимости от их массы.
В методе ВЭЖХ-МС жидкостная хроматография (ВЭЖХ) используется для разделения компонентов анализируемой смеси, а масс-спектрометрия (МС) применяется для идентификации и количественного анализа этих компонентов на основе их массы и заряда. В результате получаются спектры масс, которые могут быть использованы для определения состава и концентрации различных соединений в образце.
Взятие крови для анализа происходит в клинической лаборатории. Кровь может быть взята из вены или из пальца. Обычно необходимо получить плазму или сыворотку крови для анализа.
Полученный образец крови подвергается специальной обработке, которая может включать очистку, экстракцию или дегидратацию, чтобы удалить нежелательные компоненты и концентрировать анализируемые аминокислоты и ацилкарнитины.
После обработки образца происходит выделение аминокислот и ацилкарнитинов с использованием метода ВЭЖХ. Этот метод основан на разделении компонентов смеси на основе их химических свойств и взаимодействия с стационарной фазой (колонкой) и подвижной фазой (раствором). ВЭЖХ позволяет разделить и идентифицировать отдельные аминокислоты и ацилкарнитины в образце.
После выделения аминокислот и ацилкарнитинов они направляются в масс-спектрометр для их количественного и качественного анализа. Масс-спектрометр измеряет массу и заряд ионов, образованных из анализируемых соединений, и создает спектр масс, который может быть использован для определения идентичности и концентрации каждого компонента.